@PHDTHESIS{ 2025:1871394201, title = {Análise genômica e caracterização funcional de Limosilactobacillus fermentum JAC 231 como candidato a probiótico}, year = {2025}, url = "https://tedebc.ufma.br/jspui/handle/tede/6994", abstract = "O gênero Lactobacillus é constituído por bactérias Gram-positivas catalase-negativas, tolerantes a ácidos, não formadoras de esporos e fermentadores de carboidratos. Uma recente reclassificação desse gênero levou a uma mudança de nomenclatura, gerando novos 23 gêneros. A espécie Lactobacillus fermentum foi renomeada de Limosilactobacillus fermentum. Linhagens de L. fermentum ocupam diversos nichos, e em humanos é considerada um indicador de uma microbiota normal e saudável. Muitas linhagens têm sido investigadas por atuarem na manutenção da função da barreira epitelial, exclusão competitiva, atividade imunomoduladora e síntese de substancias antimicrobianas (ácido lático, H2O2 e bacteriocinas) com atividade ampla contra microrganismos patogênicos, motivando seu uso como probiótico. A caracterização da atividade próbiotica e as tecnologias de sequenciamento do genoma têm sido ferramentas importantes para obter informações sobre os aspectos metabólicos e de segurança de cada linhagem direcionando pesquisas para seu o uso biotecnológico e terapêutico. Este estudo teve por objetivo sequenciar o genoma completo do isolado vaginal, L. fermentum JAC 231, analisando aspectos gerais e de segurança da linhagem, investigando as bases genotípicas e fenotípicas para seu potencial probiótico, como tolerância a condições gastrointestinais (sais biliares, adesão a mucina, adesão a células eucarióticas e pH), presença de genes de resistência e virulência. Aqui expandimos a caracterização da atividade antimicrobiana e anti-adesão dessa linhagem, avaliando o seu efeito sobre Klebisiella pneumoneae ATCC 700603, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Salmonella enteritidis ATCC 13076, Enterococcus faecalis ATCC 29212 e Escherichia coli enteropatogênica O127:H6 E2348/69-EPEC. A partir da análise de bioinformática identificamos que o genoma continha 2.064.918 pb, com conteúdo de GC de 51,4%, apresentando 1.993 sequências codificadoras de proteínas relacionadas, principalmente, ao metabolismo de proteínas, carboidratos e aminoácidos. A análise comparativa revelou, que L. fermentum JAC 231, compartilha 2.204 agrupamentos ortólogos com a outras cinco linhagens probióticas de L. fermentum (MCC 2760, AGR 1485, ATCC 23271, CECT 5716, e IFO 3956). A investigação do genoma demonstrou que L. fermentum JAC 231, possui genes que codificam para uma bacteriocina (Enterolisina A), genes de tolerância ao estresse, síntese de vitaminas e sobrevivência às condições gastrointestinais. Além disso, observamos a ausência de genes que codificam para fatores de virulência e a presença de genes de resistência intrínseca à vancomicina. Fenotipicamente, L. fermentum JAC 231 apresentou sensibilidade a maioria dos antibióticos testados, exceto vancomicina, como já visualizado na análise do genoma. Capacidade de tolerar o pH ácido (com crescimento de 107,7% no pH 2 e 75,29% no pH 4), assim como aos sais biliares nas concentrações de 0,5% (87,34) e 1% (84,76%). Demonstrou, ainda, capacidade de adesão a mucina e às células HeLa, apresentando crescimento logaritmo de 5.9 e 5.7, respectivamente. Adicionalmente apresentou atividade antagonista no teste de overlay inibindo o crescimento de todas as bactérias utilizadas com zonas de inibição que variaram de 16.6 ± 2.08 a 28.3 ± 2.88 mm, além do potencial anti-adesão observado, principalmente, nos ensaios de deslocamento e exclusão. Dessa forma, nosso estudo confirma as características e o perfil de segurança de L. fermentum JAC 231 como uma linhagem probiótica. A análise do genoma demonstrou ser eficaz para avaliar as propriedades benéficas dessa linhagem, mostrando correlação com os dados obtidos in vitro. Além disso, verificamos atividade antagonista e anti-adesão exibida por L. fermentum JAC 231. Estudos posteriores são necessários para elucidar os mecanismos pelos quais essa linhagem promissora exerce seus efeitos antimicrobianos de amplo espectro.", publisher = {Universidade Federal do Maranhão}, scholl = {PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS DA SAÚDE/CCBS}, note = {DEPARTAMENTO DE MEDICINA I/CCBS} }